《2025年资源库高中生物人教版》

1.选择培养基

答案： （1）概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。
（2）原理：人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。
（3）三种筛选目的菌株的方法：①依据某些微生物的特殊营养需求设计培养基。例如，利用以纤维素（或石油）作为唯一碳源的选择培养基，可以从混杂的微生物群体中分离出能分解纤维素（或石油）的微生物；缺乏氮源的选择培养基可用来分离固氮微生物。②在培养基中加入某种化学物质，这种化学物质没有营养作用，对所需分离的微生物无害，但可以抑制或杀死其他微生物。例如，在培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；在培养基中加入高浓度的食盐可筛选出金黄色葡萄球菌。③改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养，只能得到耐高温的微生物。经过一定时间培养后，所需菌在群落中的数量上升，再通过稀释涂布平板的方法对它进行纯培养分离。

2.稀释涂布平板法

答案： （1）系列稀释操作：①铲取土样，将样品装入纸袋中。②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。
（2）涂布平板操作：①取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。②将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。③将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。
（3）恒温培养：待涂布有菌液的培养基吸收后，将平板倒置，放入30-37℃的恒温培养箱中培养1-2d。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。

1.显微镜直接计数法

答案： （1）概念：显微镜直接计数法是先将待测样品制成悬液，取一定量的悬液，利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量，从而计算单位体积内的微生物总数。
（2）血细胞计数板：血细胞计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积为1mm²和高为0.1mm的计数室，在1mm²的面积里又被划分成25个（或16个）中格，每个中格进一步划分成16个（或25个）小格，计数室都是由400个小格组成。
（3）在计数区盖上一片盖玻片，然后将均匀稀释的样品滴在盖玻片边缘，使样品自行流入，静待细胞沉降后，在显微镜下计数4-5个中格的细胞数，并求出每个小格所含细胞的平均数。按下面公式即可求出每毫升样品所含的细胞数：每毫升原液所含细胞数=每小格平均细胞数×400×10⁴×稀释倍数。
（4）优点和缺点：此法多用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。①优点：此法所需设备简单，能迅速得到结果，且在计数的同时能观察到所研究的微生物的形态特征。②缺点：不能直接区分死菌与活菌。