《2025年资源库高中生物人教版》

2.酵母菌纯培养的操作步骤

答案： ②灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力100kPa、温度为121℃条件下，灭菌15-30min；将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h。
③倒平板：待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。倒平板的具体操作步骤：a.拔出锥形瓶的棉塞；b.将瓶口迅速通过火焰；c.用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基（10-20mL）倒入培养皿，立即盖上皿盖；d.等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。
（2）接种和分离酵母菌：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。
（3）培养酵母菌：将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24-48h。

3.平板划线法

答案： （1）概念：平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。
（2）平板划线法操作简单，但是单菌落不易分离。
（3）实验结果分析：①如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合酵母菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；②如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。