《2025年资源库高中生物人教版》

5.培养基的配制原则

答案： （1）目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等选择原料配制培养基。例如用于生产的培养基应具有原料易得、价格低廉、配制方便等特点。
（2）营养要协调：①营养物质的浓度要适宜。营养物质的用量过少，不能满足微生物的营养需要；用量过多，则可能会对微生物的生长有抑制作用。②营养物质间的用量比例要适宜，营养物质间比例过高或过低，都会影响微生物的代谢及繁殖。
（3）pH要适宜：不同微生物适宜生长的pH范围不同。由于微生物在生长代谢过程中，营养物质的利用和代谢产物的生成往往会改变环境中的pH，为了维持培养基中pH的相对稳定，可在培养基中加入缓冲剂。最常用的是磷酸氢二钾和磷酸二氢钾缓冲系统。
（4）培养基还需要满足微生物生长对特殊营养物质以及O₂的需求。如培养乳酸菌需要在培养基中添加维生素；培养霉菌一般需要将培养基调至酸性；培养细菌一般需要将培养基调至中性或弱碱性；培养厌氧微生物需要提供无氧的条件。

6.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

答案： （1）计算：根据配方比例，计算配制1000mL的液体培养基时，各成分的用量。
（2）称量：准确称取各成分。称取蛋白胨时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖，目的是防止蛋白胨吸收空气中的水分。
（3）溶化：①加水加热溶化牛肉膏；②加入蛋白胨和氯化钠，继续加热；③加入琼脂；④补加蒸馏水到1000mL。整个过程要不断用玻璃棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
（4）灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌；所用培养皿用报纸包紧后用于热灭菌箱灭菌。
（5）倒平板：待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。倒平板的操作步骤：①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；②使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；③用左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，左手立刻盖上皿盖；④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。