《2026年理想树图书高考必刷卷42套模拟卷汇编高中生物全一册通用版江苏专版》

23.(13分)TRE 元件是一种特定的 DNA 序列，由多个四环素操纵子(tetO)串联组成。TetR(四环素阻遏蛋白)是大肠杆菌中的一种蛋白质，含有 DNA 结合域，能够特异性地识别并结合 TRE 序列。在没有四环素的情况下，TetR 与 TRE 结合，抑制基因表达；在四环素存在时，TetR 与之结合，释放 TRE，允许基因表达。通过基因工程手段，TetR 可以被改造成不同的形式，如 tTA 和 rtTA。回答下列问题：
(1)TRE、TetR 的基本组成单位分别是脱氧核苷酸、氨基酸。
(2)四环素(Tet)诱导表达系统是一种基于大肠杆菌的 Tet 抗性所建立的用于诱导基因表达的调控系统，分为抑制型系统(Tet - off)和激活型系统(Tet - on)。
①结合图1分析，tTA、rtTA 与 TRE 结合后对 Tet 抗性基因表达的影响是促进、促进(填“促进”或“抑制”)。四环素与 tTA、rtTA 结合后可以(填“可以”或“不可以”)改变其构象。若要使 Tet 抗性基因在非调控状态处于表达状态，应选择的诱导表达系统是抑制型系统(或Tet - off)。

②tTA：通过将 TetR 与单纯疱疹病毒的 VP16(病毒粒子蛋白 16)的 C 端结构域融合而成的。rtTA：通过改变几个对四环素依赖抑制有重要作用的氨基酸残基，从而导致了一种反 Tet 阻遏物(rTetR)的产生，再将 rTetR 与 VP16 融合得到 rtTA。推测产生 tTA 和 rtTA 的变异类型分别是基因重组、基因重组和基因突变。
(3)图2所示为科研人员预期的转基因成功的小鼠(gL)体内细胞—细胞接触的信号通路：将绿色荧光蛋白(GFP)设计为信号分子，αGFP - N - tTA 融合蛋白为受体，完成细胞间的信息交流。操作时需获得以心肌细胞作为信号发送细胞的转基因小鼠，为保证在心肌细胞中特异性表达 GFP，表达载体中应含有心肌细胞中特异表达基因的启动子，构建表达载体时需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶。将构建好的表达载体导入小鼠的受精卵中，同样方法获得内皮细胞特异性表达 αGFP - N - tTA 的转基因小鼠。将上述两种转基因小鼠杂交，经筛选获得 gL 小鼠。在 gL 小鼠中，科研人员使用 LacZ 基因作为报告基因。当内皮细胞与心肌细胞接触时，由于 GFP 和 αGFP - N - tTA 结合，引起受体被切断，tTA被释放，进入细胞核与 tetO 结合，启动 LacZ 基因表达，使正在与心肌细胞接触的内皮细胞呈蓝色。

答案： 23.(每空1分，共13分)
(1)脱氧核苷酸 氨基酸
(2)①促进 促进 可以 抑制型系统(或Tet - off)
②基因重组 基因重组和基因突变
(3)受体 心肌细胞中特异表达基因的启动子 限制酶和DNA连接酶 受精卵 受体被切断，tTA被释放