《2026年理想树图书高考必刷卷42套模拟卷汇编高中生物全一册通用版江苏专版》

23. (13 分)科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草，培育过程如图 1 所示，如表所示为相关限制酶识别序列及切割位点。回答下列问题：


(1)利用 PCR 技术扩增抗盐基因，在设计引物时需要在两种引物的5′(填“5’”或“3’”)端分别加上BamHI和HindIII(填限制酶名称，2 分)的识别序列，以便重组质粒的构建和筛选。
(2)进行 PCR 时，PCR 反应体系中所加 dNTP 的作用有既作为原料又提供能量(2 分)，影响退火温度的因素主要有引物的长度、引物中G和C的含量，若温度过低会导致非特异性扩增片段增多。
(3)若用 Sau3AⅠ酶切过程①获得的重组质粒，最多获得9种不同的 DNA 片段。
(4)步骤①所使用的运载体中未标出的必需元件还有启动子、终止子；步骤②中需先用Ca²+处理农杆菌以便将重组质粒导入农杆菌细胞。
(5)在将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整植株的固体培养基中，除营养物质外还必须添加植物激素(或生长素和细胞分裂素)。
(6)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，图 2 表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基中除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基 B 还含有氨苄青霉素(或氨苄青霉素和四环素)。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是4和6菌落中的细菌。

答案：
(1)5′
BamHI和HindIII
(2)既作为原料又提供能量
引物中G和C的含量
非特异性扩增片段增多
(3)9
(4)启动子、终止子
Ca²+
(5)植物激素(或生长素和细胞分裂素)
(6)氨苄青霉素(或氨苄青霉素和四环素)
4和6