《2025年点金训练精讲巧练高中生物选择性必修3人教版》

3. 科学家将海鱼的抗冻蛋白基因利用PCR方法扩增，下图1是扩增的目的基因的示意图。为了寻找合适的载体，科学家对某载体用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶进行酶切后，再利用琼脂糖凝胶电泳得到图2所示图谱(其中1号泳道是标准DNA样品，2号、3号、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果)。下列说法正确的是(D)

A.应选用引物1和引物4对目的基因进行扩增
B.扩增5次后有32个等长的目的基因片段
C.DNA分子经过染色可在自然光下观察得到图2所示图谱
D.由图2可知该载体DNA分子中两种限制酶的酶切位点各有一个

答案： 3. D 解析：DNA聚合酶只能从引物的3′端开始延伸DNA链，因此应选用引物2和引物3对目的基因进行扩增，A错误；DNA分子在PCR仪中经过5次循环后会产生2⁵=32个DNA分子，其中只有2个DNA分子含有最初的模板链，另仅含有第一次复制产生的单链参与形成的DNA分子有8个，因此经过5次复制产生等长的目的基因片段有32-10=22个，B错误；琼脂糖凝胶电泳染色剂在自然光下很难看到，除非条带很亮，一般在紫外灯下观察，C错误；当仅用一种限制酶切割载体时，图中的2号、3号仅产生一种长度的DNA片段，说明该DNA分子中两种限制酶的酶切位点各有一个，D正确。