《2025年点金训练精讲巧练高中生物选择性必修3人教版》

三、将目的基因导入受体细胞
1. 转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2. 转化方法
(1)导入植物细胞
① 花粉管通道法
Ⅰ. 用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中。
Ⅱ. 在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊。
② 农杆菌转化法
Ⅰ. 农杆菌的特点：农杆菌能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物；农杆菌的Ti质粒上的T-DNA能够整合到所侵染细胞的染色体DNA上。
Ⅱ. 转化方法：将目的基因插入农杆菌________中，让农杆菌侵染植物细胞。
(2)导入动物细胞
① 常用方法：显微注射技术。
② 常用受体细胞：受精卵。
(3)导入微生物细胞
① 方法：用Ca²⁺处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
② 受体细胞：原核生物(使用最广泛的是大肠杆菌)。
③ 原核生物的特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。

答案： 1. 稳定和表达
2.
(1)①I.子房 Ⅱ.花粉管通道 胚囊 ②I.双子叶 裸子 T-DNA 染色体DNA Ⅱ.Ti质粒的T-DNA
(2)①显微注射技术 ②受精卵
(3)①Ca²⁺ ②原核生物

四、目的基因的检测与鉴定
1. 分子水平的检测(连线)

2. 个体生物学水平的鉴定：包括抗虫、抗病的接种实验，以确定是否有抗性及抗性程度。

答案： 1. ①②—a ③—b
2. 个体生物学水平的鉴定：包括抗虫、抗病的接种实验，以确定是否有抗性及抗性程度。

五、DNA片段的扩增及电泳鉴定
1. 实验原理
(1)PCR利用了DNA的________原理，通过调节温度来控制DNA双链的________。
(2)在凝胶中DNA分子的迁移速率与________等有关。
(3)电泳：在一定的pH下，DNA分子中具有的________可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子向着________的电极移动。
(4)PCR产物的鉴定方法：琼脂糖凝胶电泳。
2. 目的要求
(1)了解PCR和电泳鉴定的基本原理。
(2)尝试进行PCR的基本操作并用电泳鉴定PCR的产物。
3. 方法步骤

(1)DNA片段的扩增

(2)DNA片段的电泳鉴定过程

答案： 1.
(1)热变性 解聚与结合
(2)凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象
(3)可解离基团 与它所带电荷相反
(4)琼脂糖凝胶电泳
2.
(1)了解PCR和电泳鉴定的基本原理。
(2)尝试进行PCR的基本操作并用电泳鉴定PCR的产物。
3.
(1)微量移液器 微量离心管 使反应液集中在管的底部 55℃,30s 94℃,1min
(2)0.8%～1.2% 梳子 电泳槽 1 PCR 指示分子大小 1～5 凝胶边缘 紫外灯