《2025年点金训练精讲巧练高中生物选择性必修3人教版》

1. 下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，错误的是(B)

A.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度
B.若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照
C.在“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中，应采用稀释涂布平板法
D.计数时，应选择至少3个菌落数为30~300之间的平板进行计数并取平均值

答案： 1.B 解析：利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度，稀释倍数太低，平板上菌落太多，会长在一起，稀释倍数太高，平板上菌落数目过少，都不易进行计数，A正确；若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种了的没有选择作用的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，B错误；在“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中，应采用稀释涂布平板法，C正确；计数时，通常选择至少3个菌落数为30～300的实验组平板进行计数并取平均值，D正确。

2. 土壤中有丰富的微生物，要利用其中某种微生物，需要进行菌种的分离和纯化，过程如下图所示。下列叙述错误的是(A)

A.若目的是筛选分解尿素的细菌，则尿素可以作为该菌的氮源和碳源
B.3号试管的稀释倍数为1×10⁴，理论上3号试管的活菌数应是4号试管的10倍
C.4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为1.1×10⁸个
D.该种方法统计的菌落数比活菌的实际数目少

答案： 2.A 解析：若目的是筛选分解尿素的细菌，则尿素可以作为该菌的氮源，不能作为碳源，A错误；由题图分析可知，3号试管的稀释倍数为1×10⁴倍，4号试管的稀释倍数为1×10⁵，则理论上3号试管的活菌数应是4号试管的10倍，B正确；4号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的活菌数为(110+108+112)÷3÷0.1×10⁵=1.1×10⁶个，C正确；进行稀释涂布平板法计数时可能发生两个或多个细菌细胞长成一个菌落，故该实验方法统计得到的菌落数往往会比实际活菌数目低，D正确。

3. 孔雀石绿(简称MG)是广泛使用的有机染料，在自然环境中极难降解，容易引起土壤污染，进而危害人体健康。因此，从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明。请回答下列问题：
(1)培养基的配制：MG降解菌富集培养基需含有NaH₂PO₄、KH₂PO₄、NaCl、NH₄Cl、CaCl₂、MgSO₄、水等，再加______作为唯一碳源。配制好的培养基，需用______法进行灭菌。
(2)MG高效降解菌株的分离和纯化：图中所示的分离纯化细菌的方法是______，用该方法统计的样品菌落数目比活菌的实际数目______(填“少”或“多”)，原因是______。实验室采用此方法，将A中的1mL菌液稀释1000倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经正确操作培养后，3个平板上的菌落数分别为150、158和160。据此可得出每升样品中的活菌数至少为______个。
(3)MG高效降解菌株的鉴定：将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基(其他营养成分等适宜)上，根据培养基是否出现______来鉴别出目的菌株，原因是______。

答案： 3.解析：
(1)该实验的目的是筛选出高效的MG降解菌，则培养基中应以MG作为唯一碳源，能够降解MG的细菌能生长，其他微生物的生长会受到抑制，从而达到筛选的目的。配制好的培养基，需用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。
(2)稀释涂布平板法能用于分离和计数，题图中分离纯化细菌的方法是稀释涂布平板法。用该方法(稀释涂布平板法)统计样品的菌落数目比活菌的实际数目少，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。根据计算公式可计算出每升样品中的活菌数至少为(150+158+160)÷3÷0.1×1000×10³=1.56×10⁹个。
(3)MG高效降解菌株的鉴定：将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基(其他营养成分等适宜)上，已知MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明，故可根据培养基是否出现透明圈来鉴别目的菌株，这是因为目的菌株通过降解MG生长，使菌落周围的培养基变透明，出现透明圈。 答案：
(1)孔雀石绿(MG) 高压蒸汽灭菌
(2)稀释涂布平板法 少 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 1.56×10⁹
(3)透明圈 目的菌株通过降解MG生长，使菌落周围的培养基变透明，出现透明圈