《2025年点金训练精讲巧练高中生物选择性必修3人教版》

探究活动
利用PCR可以在体外进行DNA片段的扩增，扩增产物可通过电泳进行鉴定，思考并回答下列两个问题：
探究1. 待所有组分都加入后，离心管盖子盖严的目的是什么？
探究2. 为什么要离心？在离心前一般要用手轻轻弹击离心管侧壁，这样做的目的是什么？

答案： 探究1. 提示：离心管盖子盖严的目的是防止实验中盖子脱落或液体外溢。
探究2. 提示：离心的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效率。离心前一般要用手轻轻弹击离心管侧壁，这样做的目的是使反应液混合均匀。

1. 关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列叙述正确的是(A)

A.PCR仪实质上就是一台能自动调控温度的仪器，但在使用时需根据扩增的DNA片段以及引物的情况人工设定合适的温度
B.PCR反应体系中的10倍浓缩的扩增缓冲液中含有Mg²⁺、4种脱氧核糖核苷酸等成分
C.为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水和移液器等在使用前都必须进行高压灭菌处理
D.电泳时，电泳缓冲液不能没过凝胶，防止凝胶加样孔中的电泳样液流出

答案： 1. A 解析：PCR仪实质上就是一台能自动调控温度的仪器，但在使用时需根据扩增的DNA片段以及引物的情况人工设定合适的温度，用于完成DNA的扩增，A正确；PCR反应体系的主要成分包含：扩增缓冲液(含Mg²⁺)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物，B错误；为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水等在使用前都必须进行高压灭菌处理，移液器不需要高压灭菌处理，C错误；电泳时，电泳缓冲液以没过凝胶1mm为宜，D错误。

2. 农杆菌Ti质粒上的T - DNA可以转移并随机插入被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增出T - DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T - DNA插入的具体位置。下列相关叙述错误的是(B)


A.PCR技术依据的原理是DNA半保留复制
B.选择图中的引物②③组合可扩增出两侧的未知序列
C.若扩增n次，则共消耗2ⁿ⁺¹ - 2个引物
D.常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物

答案： 2. B 解析：PCR扩增技术依据的原理是DNA半保留复制，A正确；DNA的两条链反向平行，子链从引物的3′端开始延伸，利用图中的引物①④组合可扩增出两侧的未知序列，B错误；若扩增n次，可得到2ⁿ个DNA分子，有2ⁿ⁺¹条链，除去初始的DNA两条模板链，则共消耗2ⁿ⁺¹-2个引物，C正确；常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物，D正确。