《2026年高考领航卷生物》

21. (11分)人血清白蛋白在医学界被称作“黄金救命药”。科研人员运用基因工程技术从大米中成功提取出了人血清白蛋白，该类大米植株培育流程如图所示，实验中用到的限制酶及其识别的碱基序列和切割位点如表所示。回答下列问题。


(1)通过PCR扩增血清白蛋白基因时，需要在反应体系中加入耐高温的 DNA 聚合酶、引物、脱氧核苷酸、模板DNA、缓冲溶液等，缓冲溶液中一般要添加Mg²⁺(填离子)，其作用是激活耐高温的 DNA 聚合酶。在反应体系中，随着PCR反应的进行，分子数量逐渐减少的是引物和脱氧核苷酸。模板与引物在PCR反应的复性阶段开始结合。
(2)通过PCR扩增血清白蛋白基因时，通常选择下列D、F组合作作为引物对。
A. 5'-ATCCAC-3'
B. 5'-GATGAG-3'
C. 5'-GCGGAT-3'
D. 5'-CTACTC-3'
E. 5'-GTCATC-3'
F. 5'-GTGGAT-3'
(3)对PCR扩增出的产物进行电泳时，发现除了目标序列外还有很多非特异性条带，出现该现象的原因可能有引物特异性不强、复性温度过低(答出两点)。
(4)为使切割后的目的基因和质粒正确连接，需要在血清白蛋白基因左侧和右侧分别添加限制酶SmaⅠ、HindⅢ的识别序列。在农杆菌感染的操作步骤完成以后，需要对所有受体细胞进行筛选的原因是并不是所有受体细胞都成功导入血清白蛋白基因。

答案： 【参考答案】（除标明外，每空 1 分）
(1)耐高温的 DNA 聚合 Mg²⁺ 激活耐高温的 DNA 聚合酶 引物 脱氧核苷酸 复性
(2)D、F
(3)引物特异性不强、复性温度过低(2 分)
(4)SmaⅠ、HindⅢ 并不是所有受体细胞都成功导入血清白蛋白基因