《2026年高考领航卷生物》

21. 【2026四川成都部分学校联考】（10分）苏云金杆菌毒蛋白基因CryIAc和半夏凝集素抗虫基因Pta是两种抗虫基因，常被用于转基因作物中以增强植物对害虫的抵抗力。为增强番茄的抗虫能力，实验人员构建了含有CryIAc基因和Pta基因的双价抗虫基因表达载体，如图所示。回答下列问题：

(1)构建双价抗虫基因表达载体的过程中需要用到的酶有限制酶、DNA连接酶(答出2种)。
（2）图中双价抗虫基因表达载体上含有的除草剂抗性基因的作用是作为标记基因，用于筛选含有双价抗虫基因表达载体的番茄细胞，一般利用农杆菌转化法将该载体导入番茄细胞。
（3）为检测转基因抗虫番茄是否培育成功，实验人员结合分子检测进行了初步验证，如下：
①目的基因PCR检测：提取番茄叶片DNA，需要根据CrylAc基因和Pta基因的特定碱基序列来设计特异性引物进行PCR扩增，确认目的基因是否整合到番茄的基因组中。
②蛋白表达检测：检测叶片中CryIAc或Pta蛋白的表达情况。步骤①②的检测结果如表所示，WT表示非转基因番茄，1~3表示转基因抗虫番茄，M是标准参照物。

③据表分析，最可能获得两种抗虫能力的转基因番茄是3(填序号)，其余转基因番茄未能获取两种抗虫能力的原因是转基因抗虫番茄1转入了CrylAc基因和Pta基因，但只表达了CrylAc蛋白；转基因抗虫番茄2只转入和表达了Pta基因。
(4)与使用化学农药相比，培育转基因抗虫番茄的意义是减少了化学农药对环境的污染；减少了化学农药对其他生物的伤害，保护了生物多样性(答出1点)。

答案： 21.[参考答案]　(除标明外，每空2分)
(1)限制酶、DNA连接酶(1分)
(2)作为标记基因，用于筛选含有双价抗虫基因表达载体的番茄细胞　农杆菌转化(1分)
(3)CrylAc基因和Pta基因(1分)　3　转基因抗虫番茄1转入了CrylAc基因和Pta基因，但只表达了CrylAc蛋白；转基因抗虫番茄2只转入和表达了Pta基因
(4)减少了化学农药对环境的污染；减少了化学农药对其他生物的伤害，保护了生物多样性(1分)
[解题思路]　基因工程　
(1)构建双价抗虫基因表达载体的过程中需要用到限制酶和DNA连接酶。
(2)除草剂抗性基因可作为标记基因，用于筛选含有双价抗虫基因表达载体的番茄细胞。一般利用农杆菌转化法将该载体导入番茄细胞。
(3)①目的基因是CrylAc基因和Pta基因，因此要根据CrylAc基因和Pta基因的特定碱基序列来设计特异性引物进行PCR扩增。③表中结果说明，转基因抗虫番茄1转入了CrylAc基因和Pta基因，但只表达出了CrylAc蛋白；转基因抗虫番茄2只转入和表达了Pta基因；转基因抗虫番茄3转入了CrylAc基因和Pta基因，且两种蛋白均能表达，因此转基因抗虫番茄3最可能获得两种抗虫能力。
(4)与使用化学农药相比，培育转基因抗虫番茄的意义是减少化学农药对环境的污染；减少化学农药对其他生物的伤害，保护了生物多样性。
ccdB基因表达毒蛋白可使工程菌致死。
月考情信息卷(二)