《2025年天星教育试题调研生物第10辑》

调研2 [2025山东青岛3月模拟节选]
科学家将图1中的vtg基因与图2中Luc基因载体连接，形成vtg–Luc基因重组载体，成功培育了转基因斑马鱼，当极微量雌激素污染水体时，斑马鱼的肝脏就发出荧光，实现对环境雌激素污染的可视化监测。Luc表示荧光素酶基因(无启动子)，Kan^r为卡那霉素抗性基因，Ori为复制起点，BamHⅠ、BclⅠ、HindⅢ、BsrGⅠ、XhoⅠ为限制酶，→表示转录方向。
注：图1 DNA片段不含有图2所示限制酶的识别序列。
(1) 为使vtg基因与Luc基因载体形成重组载体，选用限制酶BclⅠ和HindⅢ切割Luc基因载体可降低“空载”概率。通过PCR技术获取vtg基因时，需设计合适的引物，且要保证vtg基因与Luc基因载体的连接，依据图示信息推测引物1包含的碱基序列为5’–TGATCAAACTAT–3’(写出已知的所有碱基序列)。

 

答案： BclⅠ和HindⅢ TGATCAAACTAT