Question

【题目】神经纤毛蛋白-1 （ NRP-1） 是血管内皮生长因子的新型受体，通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成。本研究将为 NRP-1 单克隆抗体靶向治疗乳腺癌提供数据基础。

（1）取乳腺癌 （MCF7）组织块，运用_____技术获得 MCF7 细胞用于后续实验。 用重组的人_____蛋白对小鼠进行注射， 使小鼠产生免疫反应， 制备杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取培养孔中的________（填“ 上清液”或“沉淀细胞”），进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养，获得 NRP-1 单克隆抗体 （ NRP-1 MAb） 。

（2）将 MCF7 细胞制成单细胞悬液，等量注入 4 组裸鼠右前腋下，接种后 3 天开始给药， 共给药 7 次。每隔 5 天测算一次肿瘤的肿瘤体积，如下图所示。

对照组注射_____，从上图中可以看出_____。

（3）注射不同剂量 NRP-1 MAb 33 天后，剥离肿瘤组织称重，实验结果如下图：

该结果表明____________________________________________________。

（4）基于以上研究，科学家们对该抗体的用药方式有两种观点：谨慎用药和适宜浓度用药。 你支持哪个观点，并说出理由___________________________________。

Answer 1

【答案】动物细胞培养 神经纤毛蛋白-1（NRP-1） 上清液 等量的生理盐水 NRP-1 MAb 能够有效地降低肿瘤的体积，中、高浓度抗体的降低效果比低浓度的效果更显著 NRP-1 MAb 可以明显降低肿瘤组织的重量，中、高浓度抗体的降低效果稍微没有低浓 度的好，但这种差异并不显著 ）第 1 种答案：支持谨慎用药 理由：随着治疗时间的延长，中高剂量和低剂量的 NRP-1 MAb 在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现的不一致性可能会加大，应进行后续研究，现阶 段谨慎用药。 第 2 种答案：支持适宜浓度用药 理由：该抗体已经显示了显著的抑瘤效果，中高剂量和低 剂量的 NRP-1 MAb 在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上虽然出现了不一致性，但这种不一致性 很小，可以考虑适宜浓度用药。

【解析】

动物细胞融合，又称细胞杂交，指将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。
单克隆抗体制备的过程中需要经过两次筛选，第一次用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；第二次用专一抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。

（1）取乳腺癌（MCF7）组织块，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行分散处理后，运用动物细胞培养技术获得MCF7细胞。要制备NRP-1单克隆抗体，需要用重组的人NRP-1蛋白对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，产生相应的浆细胞，与该浆细胞与骨髓瘤细胞进行融合处理，制备杂交瘤细胞。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，可以从培养液即上清液中提取到单克隆抗体，可以用抗原-抗体杂交技术进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养，获得NRP-1单克隆抗体（NRP-1 MAb）。

（2）实验的自变量是给药的剂量和时间，因变量是肿瘤的体积，对照组应该注射等量的生理盐水，根据实验结果可知，NRP-1 MAb 能够有效地降低肿瘤的体积，中、高浓度抗体的降低效果比低浓度的效果更显著。

（3）注射不同剂量NRP-1 MAb 33天后，剥离肿瘤组织称重，根据实验数据可知，NRP-1 MAb 可以明显降低肿瘤组织的重量，中、高浓度抗体的降低效果稍微没有低浓度的好，但这种差异并不显著。

（4）支持谨慎用药理由 ：随着治疗时间的延长，中高剂量和低剂量的 NRP-1 MAb 在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现的不一致性可能会加大，应进行后续研究，现阶段谨慎用药。

支持适宜浓度用药 理由：该抗体已经显示了显著的抑瘤效果，中高剂量和低剂量的 NRP-1 MAb 在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上虽然出现了不一致性，但这种不一致性很小，可以考虑适宜浓度用药。