Question

【题目】某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。实验基本步骤如下：

（1）分解尿素的微生物含有_____，因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成________使培养基的碱性增强。

（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起_____作用；培养基中添加_____作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。

（3）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间， 这样做的目的是__________；然后将 1mL 瘤胃样液稀释 1000 倍，在 3 个平板上用涂布法分别接入 0．1mL稀释液；经适当培养后，3 个平板的菌落数分别为 49、47 和 45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为_____，理论上，统计的菌落数往往_______________（低、等、高）于接种的实际活菌数目。

Answer 1

【答案】脲酶（分解尿素的酶） 氨（NH3） 凝固剂 酚红 检测培养基平板灭菌是否合格 4．7×108 低

【解析】

本题主要考查微生物的培养、分解尿素的细菌的鉴定等知识点。由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红。

（1）分解尿素的微生物含有脲酶（分解尿素的酶），因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成氨（NH3）使培养基的碱性增强。
（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起凝固剂作用；培养基中添加酚红作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。

（3）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45，因此据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的（1L=1000mL）中的活菌数=（49+47+45）/3×1000×10×1000=4.7×108。由于每个菌落可能是一个或多个活菌增殖而来，统计的菌落数往往低于接种的实际活菌数目。