【题目】某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题:

(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方如下:

牛肉膏

蛋白胨

NaCl

琼脂

蒸馏水

5.0 g

10.0 g

5.0 g

20.0 g

定容至1 000 mL

其中提供氮源的是_________________。微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时,溶化后灭菌前还应注意____________

(2)将配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入___________中灭菌,先把锅内水加热煮沸并将其中原有____________彻底排出后将锅密闭。灭菌压力100kPa,温度__________,时间15~30min。灭菌完毕后如果棉塞上沾有培养基,此试管应________

(3)如图为倒平板操作过程,操作时要待培养基______________________________时,在酒精灯火焰附近进行。制备固体培养基时,要待平板冷凝后,将平板倒置,其主要目的是__________________________________________________

【答案】牛肉膏、蛋白胨 调节pH 高压蒸汽灭菌锅 冷空气 121℃ 废弃 冷却至50℃左右 防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染

【解析】

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌。微生物的实验室培养的关键在于防止杂菌污染,平板冷凝后要将平板倒置,其原因是防止皿盖冷却水倒流入培养基而造成污染。

(1)制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料主要有牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐和琼脂等。配方中能够提供氮源的是蛋白胨和牛肉膏,其中牛肉膏还可以提供能源。微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时,溶化后灭菌前还应注意调节pH,以满足不同微生物生长对pH的需求。
(2)培养基灭菌应用高压蒸汽灭菌法,故配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入高压蒸汽锅中灭菌。使用高压蒸汽灭菌锅时应注意,先向锅内倒入适量的水,把锅内水加热煮沸并将其中原有的冷空气彻底排出后再将锅密闭。进行高压蒸汽灭菌的条件是压力100kPa,温度121℃,时间15~30min。灭菌完毕后如果棉塞上沾有培养基,为防止培养基污染,此试管应废弃掉。
(3)倒平板时要待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近进行。制备固体培养基时,要待平板冷凝后,将平板倒置,其主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。

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