Question

【题目】（生物技术实践）

尿素是一种重要的农业氮肥，但不能被农作物直接吸收，土壤中有一种好氧型细菌能把尿素分解成氨。欲从土壤中筛选出能分解尿素的细菌并予以纯化计数，采用了如图所示的基本操作流程。

请回答下列问题：

（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生______________。

（2）能在该选择培养基上生长的细菌______________（填“一定”或“不一定”）都能分解尿素，若在平板中加入酚红，目的菌落出现的变化是_______________。

（3）筛选得到的菌落可以采用平板划线法进一步纯化,每次划线后接种环必须____________，才能再次用于划线。纯化获得的菌种可以保存在试管中，塞上棉塞或盖上封口膜，不能密封，原因是_____________________。

（4）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有和，其作用有__________________。（答出两点）

Answer 1

【答案】脲酶 不一定 周围指示剂变红(或周围出现红圈) 灼烧并冷却 细菌有氧呼吸需要气体流通 为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中PH稳定

【解析】

1、欲从土壤中筛选出能分解尿素（产生脲酶）的细菌，所用培养基必须以尿素为唯一氮源的选择培养基；尿素分解菌在该选择培养基上能产生脲酶；尿素分解菌产生的脲酶能将尿素分解成氨，氨是碱性物质，可使酚红指示剂变红。

2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养；在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）根据以上分析可知，尿素分解菌能够产生脲酶将尿素分解为氨，而不能产生脲酶的细菌不能利用尿素为氮源。

（2）由于固氮菌也能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长，所以在该选择培养基上生长的细菌不一定都能产生脲酶；尿素分解菌产生的脲酶能将尿素分解成氨，氨是碱性物质，可使酚红指示剂变红。

（3）采用平板划线法进一步纯化时，每次划线后接种环必须灼烧并冷却，才能再次用于划线。纯化获得的尿素分解菌是一种好氧型细菌，其有氧呼吸需要气体流通，故将该菌种保存在试管中时不能密封。

（4）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，一是其作为无机盐可以为细菌生长提供无机营养，二是作为缓冲剂保持细胞生长过程中PH稳定。