Question

【题目】下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程

(1)过程①中选用EcoRⅠ和XhoⅠ两种限制酶切割的优点是_________，此外还要用到________酶。

(2)过程②中首先需要用Ca2＋处理大肠杆菌，使其处于感受态，VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为______。

(3)与植物原生质体融合相比，过程④特有的方法是用________处理。通常在选择培养基中需加入抗生素，目的是________________________。选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体________(填“是”或“不是”)单克隆抗体。

(4)图示过程应用的生物技术有______________________________________

Answer 1

【答案】防止自身环化 DNA连接 转化 灭活的病毒 防止培养过程中的污染 不是 基因工程、动物细胞培养、动物细胞融合

【解析】

制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程，①是目的基因与运载体结合，②是将目的基因导入受体细胞，给老鼠注射特定的抗原蛋白：VP40蛋白引起小鼠的特异性免疫，产生特定B淋巴细胞，④过程是动物细胞融合过程，据此答题即可。

（1）过程①中选用EcoRⅠ和XhoⅠ两种限制酶切割可以使目的基因的两端获得不同的粘性末端，所以这样处理的优点是防止目的基因自身环化，此外目的基因与运载体结合还需DNA连接酶。
（2）过程②是将目的基因导入受体细胞，此过程首先需要用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于感受态，VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为转化。
（3）与植物原生质体融合相比原理基本相同，植物原生质体融合常用物理方法和化学方法，动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒处理，通常在选择培养基中需加入抗生素，目的是防止培养过程中的污染．选择培养基上存活的杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选才可以获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，所以选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体不是单克隆抗体。
（4）图示过程应用的生物技术有：基因工程、动物细胞培养、动物细胞融合。