【题目】甲型H1N1流感是一种急性呼吸道传染病，其病原体甲型H1N1流感病毒是一种RNA病毒。针对甲型H1N1流感病毒的预防和治疗，科研人员设计了相应地两种技术路线，分别如图1、图2所示。据图分析回答下列问题：

（1）甲型H1N1流感病毒表面有一种特征性蛋白质A，适合作为疫苗的有效成分。通过基因工程的方法制备含蛋白质A的疫苗的过程如图1所示。其中过程①代表的是___________，过程③构建A基因重组载体时，应在目的基因（A基因）前后插入___________，从而保证目的基因的准确表达。

（2）甲型H1N1流感病毒表面还有一种特征性蛋白质B，制备抗蛋白B的单克隆抗体过程如图2所示。该过程中首先需要获得B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，请根据图示写出获得B淋巴细胞的方法：___________。细胞融合时常用的促融剂是______________________。

（3）HAT培养基的作用是经选择性培养筛选出___________细胞，之后还需要进行___________和抗体检测，经多次筛选，就可获得具备___________特点的杂交瘤细胞。

【答案】逆转录 启动子和终止子 向小鼠体内注入蛋白质B，再从产生免疫反应小鼠的脾脏中获得B淋巴细胞 聚乙二醇（PEG） 杂交瘤 克隆化培养 能无限增殖，又能分泌抗蛋白B抗体

【解析】

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。

（1）该病毒是RNA病毒，要先逆转录成DNA片段才能表达出相应的蛋白质，①代表逆转录。有RNA逆转录的DNA片段可能没有启动子和终止子，所以要在DNA片段前后添加启动子和终止子。

（2）单克隆抗体制备过程中要在小鼠体内注入相对应的抗原物质B，然后分离B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞融合。细胞融合用的化学试剂是聚乙二醇（PEG）。

（3）单克隆抗体制备时要筛选出产生所需抗体的杂交瘤细胞。这种杂交瘤细胞既可以无限增殖又可以产生相应抗体。通过克隆化培养这种细胞就可以获得大量单一抗体。

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