《2025年新坐标同步练习高中生物选择性必修第三册人教版青海专版》

图 1 是 PCR 反应相关过程。据图回答下列问题：

(1)利用 PCR 扩增目的基因需要提供哪些条件？
(2)图 1 所示利用 PCR 扩增目的基因,在第几轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段？
(3)如果循环 n 次,则共需消耗多少对引物？
(4)图 2 是某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列),两组引物都不合理,请分别说明理由。
(5)要保证目的基因能与载体相连接,还要对引物进行什么操作？如果要用 PCR 扩增以下 DNA 模板中的基因 1,需要的一对引物序列是怎样的？

答案：

(1)DNA模板、Taq酶、原料(4种脱氧核苷酸)、引物以及特定的温度。
(2)第3轮，如下图所示。

(3)共需消耗2ⁿ⁻¹对引物。
(4)第1组：引物Ⅰ和引物Ⅱ会因局部发生碱基互补配对而失效。第2组：引物Ⅰ'自身折叠后会因出现局部碱基互补配对而失效。
(5)要在两种引物的5'端分别加上限制酶的识别序列。引物1是5'-CTTCGAAATTC-3'；引物2是5'-CCGATCGGGAGA-3'。